




詳細介紹
一、 儀器概述:新一代中壓蛋白純化
GE Cytiva AKTA pure 150M 是一款功能強大、靈活高效的中壓層析系統,專為現代生物制藥和生命科學研究實驗室的蛋白質純化需求而設計。作為AKTA家族中專門處理中等至上樣量的型號,AKTA pure 150M結合了AKTA系列一貫的可靠性、直觀的軟件控制以及高度的模塊化靈活性,成為從實驗室研究向工藝開發放大過程中核心工具。其名稱中“150M"的“M"即代表“Medium"(中等規模),使其非常適合需要純化毫克至克級蛋白的應用場景。
二、 核心設計理念與特點
模塊化與靈活性:
AKTA pure 150M 最大的優勢在于其模塊化設計。用戶可以根據具體實驗需求,像搭積木一樣自由選配不同的功能模塊。例如,您提到的S9H樣品泵和F9-R餾分收集器就是典型的升級模塊。這種設計使得一臺主機既能進行簡單的凝膠過濾分析,也能完成復雜的多步純化流程。
出色的純化效果與重現性:
儀器采用精密的輸液泵和pH、電導率、紫外(UV)及壓力傳感器,確保在方法開發和生產過程中獲得一致且可重現的結果。這對于方法驗證、工藝放大和符合法規要求(如GMP/GLP)至關重要。
用戶友好的操作軟件:
系統通過UNICORN™ 控制軟件進行操作。UNICORN是行業黃金標準的層析控制軟件,提供從方法編輯、序列創建、實時監控到數據處理的完整解決方案。其直觀的圖形界面大大降低了操作難度,同時提供了強大的數據分析和報告生成功能。
廣泛的兼容性:
該系統與Cytiva及其它廠商的各種預裝柱和空柱架高度兼容,支持包括親和層析、離子交換、疏水相互作用、凝膠過濾及復合模式層析在內的所有主流純化技術。
三、 關鍵組件詳解(以您提供的配置為例)
S9H 樣品泵:
這是一個獨立的樣品上樣泵,是AKTA pure系統的一個重要選配項。它的主要優勢在于:
保護樣品活性: 可以將對剪切力敏感的樣品(如蛋白質復合物、病毒載體等)溫和地泵入層析柱,避免主泵可能帶來的剪切力影響。
精確上樣: 實現樣品的精確、可控上樣,尤其在進行柱上脫鹽或緩沖液交換時非常有用。
提高效率: 允許在主泵進行柱平衡的同時,用樣品泵準備樣品,縮短了整個純化周期的時間。
F9-R 餾分收集器:
這是一個用于收集層析分離后洗脫組分的核心外設。F9-R型號具有以下特點:
高容量: 可以容納標準規格的試管、深孔板等多種規格的收集容器,滿足大規模餾分收集的需求。
智能收集模式: 支持按時間、按體積、按峰(根據UV信號閾值)等多種觸發模式進行收集,確保目標蛋白峰能被準確、高效地收集,減少浪費。
可靠的樣品追蹤: 與UNICORN軟件無縫集成,每個收集管的位置和對應的層析圖譜數據都被精確記錄,便于后續的分析和鑒定。
四、 主要技術參數(以AKTA pure 150M為例)
流速范圍: 通常為0.001 ml/min 至 150 ml/min,覆蓋從微升級別的分析方法開發到百毫升級別的制備型純化。
最大壓力: 通常為5 MPa(約50 bar),適用于大多數中壓層析填料。
檢測器:
紫外檢測器: 通常配備雙波長(如280nm用于蛋白質,260nm用于核酸)甚至多波長檢測。
pH和電導監測: 實時監測緩沖液條件的變化,確保梯度洗脫的準確性。
壓力傳感器: 實時監控系統壓力,保障操作安全。
五、 主要應用領域
AKTA pure 150M廣泛應用于需要高質量蛋白純化的各個領域:
重組蛋白表達與純化: 如帶有His標簽、GST標簽等重組蛋白的親和純化及精細純化。
抗體純化: 用于單克隆抗體、抗體片段等的Protein A/G親和捕獲及后續的離子交換精純。
病毒與疫苗研究: 用于腺相關病毒(AAV)、慢病毒等病毒載體的純化。
結構生物學: 為X射線晶體學、冷凍電鏡(Cryo-EM)等提供高純度、高均一性的蛋白質樣品。
工藝開發: 是連接實驗室小試(如用AKTA avant)和中試生產之間關鍵的工藝優化和放大平臺。
總結
總而言之,GE Cytiva AKTA pure 150M不僅僅是一臺儀器,更是一個完整的蛋白純化平臺。其模塊化設計、可靠的重現性以及強大的軟件支持,使其成為科研院所、生物技術公司和制藥企業進行蛋白質研究、生物藥開發和生產的理想選擇。配備S9H樣品泵和F9-R餾分收集器等高級模塊后,其功能更加強大,能夠應對更加復雜和苛刻的純化任務。
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